بررسی اثر ضد میکروبی عصاره آبی و الکلی کالله زعفران بر روی میکروبهای پاتوژن دهان )استرپتوکوک موتانس الکتوباسیل کانديدا آلبیکنس)

Transcript

1 302 مجله دانشكده دندانپزشكي مشهد / سال / 5931 ه / 04 شماره 9 بررسی اثر ضد میکربی عصاره آبی الکلی کالله زعفران بر ری میکربهای پاتژن دهان )استرپتکک متانس الکتباسیل کانديدا آلبیکنس) فرزانه بارانی کرباسکی* حسین حسین زاده** بی بی صديقه فضلی بز*** هدی اليتی پر**** کیارش قزينی***** بهجت الملک عجمی******# * دستیار تخصصی گره دندانپزشکی کدکان دانشکده دندانپزشکی دانشگاه علم پزشکی مشهد ایران ** استاد گره فارماکدینامیک سم شناسی دانشکده دارسی دانشگاه علم پزشکی مشهد ایران *** استاد گره شیمی داریی دانشکده دارسی عض مرکز تحقیقات علم دارئی مرکز تحقیقات بیتکنلژی دارئی دانشگاه علم پزشکی مشهد ایران **** دندانپزشک ***** دانشیار گره میکربیلژی دانشکده پزشکی دانشگاه علم پزشکی مشهد ایران ****** استاد گره دندانپزشکی کدکان دانشکده دندانپزشکی دانشگاه علم پزشکی مشهد ایران تاريخ ارائه مقاله : 44/4/3 تاريخ پذيرش : 42/1/52 Evaluation of Antimicrobial effects of Aqueous and Alcoholic Extracts of Saffron on Oral Pathogenic Microbes (Streptococcus Mutans, Lactobacillus, Candida Albicans) Farzaneh Barani Karbasaki*, Hossein Hossenzadeh**, Bibi Sedigheh Fazli Bazzaz***, Hoda Velayatipour****, Kiarash Ghazvini*****, Behjat-al-molok Ajami******# * Postgraduate Student, Dept of Pediatrics, School of Dentistry, Mashhad University of Medical Sciences, Mashhad, Iran. ** Professor of Pharmacodinami and Toxicology, Faculty of Pharmacy, Mashhad University of medical sciences, Mashhad, Iran. *** Professor in Pharmaceutical Microbiology, Biotechnology Research Center, Department of Food and Drug Control, School of Pharmacy, Mashhad University of Medical Sciences, Mashhad, Iran ****Dentist ***** Associate Professor, Dept of Mycobacteriology, Ghaem Hospital, Mashhad University of Medical Sciences, Mashhad, Iran ****** Professor of Pedodontics, Dep of Pediatric Dentistry, Mashhad University of Medical Sciences, Mashhad, Iran. Received: 11 January 2016; Accepted: 12 June 2016 Introduction: Dental caries is an infectious disease and various microorganisms have a pivotal role in its onset and development. Medications used to reduce microbes are usually accompanied with side effects. Therefore, it seems necessary to search for antimicrobial agents with less side effects. In this study, we aimed to evaluate the antimicrobial effects of aqueous and alcoholic extracts of saffron on oral pathogenic microbes. Materials & Methods: In total, six 9-year-old male students were selected from a primary school. Samples of dental plaque, saliva, and depth of tooth decay were obtained from the participants to evaluate Streptococcus mutans, Lactobacillus, and Candida albicans and were sent to the laboratory afterwards. After assessing the samples via broth dilution method and incubation, six samples of Lactobacillus, eight samples of Candida albicans, and six samples of Streptococcus mutans were evaluated due to difficulty in turbidity detection. Afterwards, overnight cultures were prepared and evaluated for minimal bactericidal concentration (MBC) determination. In the next stage, penicillin and nystatin positive culture tests were used to compare the effects of microbes. In this study, one-way ANOVA was used to compare all the study groups, while pairwise comparison was performed using Tukey test. Results: Our findings were indicative of inhibitory effects of aqueous and alcoholic extracts of saffron on all three microbes. However, they were less effective compared to standard antibiotics (e.g., penicillin). A significant difference was observed between the effect of aqueous and alcoholic extracts of saffron and penicillin on the Streptococcus mutans (P<0.001). Similarly, a significant difference was found between the effects of saffron extracts and penicillin on the Lactobacillus (P<0.0001). Moreover, a significance difference was observed between extracts of saffron and nystatin on Candida albicans (P<0.001). According to the results, alcoholic extract of saffron was more successful in eliminating Candida albicans and Streptococcus Mutans, compared to aqueous extract of saffron (P<0.001). Conclusion: According to the results, while saffron had bacteriostatic effects on Streptococcus mutans and Lactobacillus, it had antifungal activities against Candida albicans. Therefore, saffron could be recommended as a mouthwash due to its herbal origin, cost-effectiveness, and fewer side effects. Key words: Extract, saffron, antimicrobial, oral pathogenic microbes. Corresponding Author: Ajamib@mums.ac.ir J Mash Dent Sch 2016; 40(3): Ajamib@mums.ac.ir ملف مسؤل نشانی: مشهد دانشکده دندانپزشکی گره پریدانتیکس تلفن:

2 بررسي اثر ضد میكربي عصاره آبي الكلي کالله )فرزانه باراني کرباسكي همكاران( زعفران چکیده مقدمه: پسیدگی دندانی یک بیماری عفنی است که میکرارگانیسمهای مختلفی ایجاد پیشرفت آن نقش دارند. دارهایی که برای کاهش میکربها مرد استفاده قرار میگیرند دارای عارض جانبی میباشند. بنابراین جستج برای ماد ضدمیکربی که حداقل عارض جانبی را داشته باشند ضرری است. لذا هدف این مطالعه بررسی اثر ضدمیکربی عصاره آبی الکلی زعفران بر میکربهای بیماری زا حفره دهان میباشد. ماد رشها: تعداد 6 دانش آمز پسر 9 ساله یک دبستان انتخاب نمنه برداری پالک دندانی بزاق عمق پسیدگی دندانی جهت بررسی سه میکرب استرپتکک متانس کاندیدا آلبیکانس الکتباسیل انجام شد نمنهها به آزمایشگاه ارسال شدند. پس انجام آزمایش به رش رقیق سی متالی انکباسین با تجه به سختی تشخیص کت 6 نمنه استرپتکک متانس 6 نمنه الکتباسیل 8 نمنه قارچ کاندیدا آلبیکنس مرد آزمایش کشت شبانه تهیه گردید جهت تعیین Minimal Bactericidal Concentration (MBC) بررسی شد. جهت مقایسه اثر آنها کشت مثبت پنی سیلین نیستاتین استفاده شد. این تحقیق برای مقایسه همه گرهها آزمن اریانس یک طرفه برای مقایسه د به دی گرهها آزمن تکی استفاده گردید. يافتهها: این مطالعه نشان داد که عصاره آبی الکلی زعفران بر ری سه میکرب اثر مهاری داشته اگر چه که قت آنها مقایسه با آنتی بیتیک )پنیسیلین( کمتر بد. مقایسه اثر عصاره الکلی آبی زعفران پنیسیلین بر ری استرپتکک متانس تفات معنیداری نشان داد که 0/000>P بد. همچنین مقایسه اثر عصاره الکلی آبی زعفران پنیسیلین بر ری الکتباسیل تفات معنیداری نشان داد 0/0000>P بد. تفات معنیداری بین نتیجه اثر عصاره الکلی آبی زعفران نیستاتین بر ری کاندیدا آلبیکنس مشاهده شد 0/00>P بد.این مطالعه نشان داد که عصاره الکلی زعفران بین بردن کاندیدا آلبیکنس استرپتکک متانس عصاره آبی مثرتر است )0/000>P(. نتیجه گیری: نتایج این مطالعه حاکی آن است که زعفران دارای اثر باکتریاستاتیک بر ری استرپتکک متانس الکتباسیل اثر ضدقارچی بر ری کاندیدا آلبیکنس میباشد. با تجه به منشا گیاهی نتیجه عارض کمتر آن بمی بدن مقرن به صرفهتر بدن زعفران شاید بتان این دار را به عنان دهان شیه تصیه نمد. کلمات کلیدی: عصاره زعفران ضدمیکربی میکربهای بیماری زای دهان. مجله دانشکده دندانپزشکی مشهد / سال 0395 ه / 00 شماره : 3 به مقدمه شیع باالی به تجه با پسیدگی جامعه تجه خاص به رشهای پیشگیری ضرری است. عامل اصلی ایجادکننده پسیدگی شامل میکربها ماد قابل تخمیر میزبان مستعد مثل دندانها بزاق میباشد. میکربها خصص استرپتکک متانس شرع ایجاد پسیدگی نقش مهمی دارد الکتباسیلسها قارچها نیز رند پسیدگی افزایش مییابند. عامل کاربرد ضدمیکربی آنتی بیتیک دهانشیههای آنتی میکربیال مجد بار علی رغم مفید بدن عارضی نیز استفاده لذا یک داری دارای که گیاهی )1( دارند. اثرات ضدمیکربی بده عارضه نیز نداشته باشد ضرری به میرسد. نظر دلیل به است بمی گیاه یک زعفران خصصیات بیلژیک متعدد آن د دهه گذشته مرد )2( مطالعه قرار گرفته است. استرپتکک متانس که نه تنها پسیدگی دندانی نقش دارد بلکه ایجاد بیماریهای دیگری مانند شقاق گشه لب التهاب غده )3( پارتید نیز نقش دارد. الکتباسیلسها نیز ایجاد پسیدگی نقش دارند عامل میکربی دیگر مثل میکربهای بیهی ایجادکننده بیماری لثه )4( میباشند. قارچها نیز مانند کاندیداآلبیکنس رند پسیدگی بیماری ( 5 )2 لثه نقش دارند. عامل شیمیایی ضدپالک که هم مان هم پیشگیری بیماری لثه نقش دارد میتان کلرهگزیدین را نام برد. کلرهگزیدین یکی عامل ضدمیکربی است

3 302 مجله دانشكده دندانپزشكي مشهد / سال / 5931 ه / 04 شماره 9 به اشکال مختلف قبیل دهانشیه خمیردندان ژل عرضه اثرات )6( میشد. ضدپالک کلرهگزیدین دی طبیعت دلیل به کاتینی ملکل کلرهگزیدین میباشد که منجر به دام اثر ضدمیکربی سطح صرت به دندان باکتریسیدال باکتریاستاتیک میشد. همین ماهیت کاتینی علت بیشتر عارض جانبی همراه با مصرف این ماده یعنی تغییر رنگ دندان خارجی )7( میباشد. جانبی متعددی عارض برای کلرهگزیدین قبیل دست رفتن حس چشایی احساس سزش مخاط دهان خشکی دهان حداقل بنابراین جستج زمینههای بیلژیک عارض امیدبخش )8( گزارش شده است. برای ماد ضدمیکربی جدید که دارای جانبی برای جدید گیاهان جمله زعفران میباشد. زعفران میباشد. خشک کالله باشند جست مرد شده ضرری استفاده گیاه جی است. اجزای طب یکی سنتی فعال Crocus stivus L. این گیاه به صرت رسمی لیست دارهای چینی ثبت شده است طب سنتی چینی برای مان هماتما آرامبخش که کردهاند منست استفاده این مختلفی را دارا افسردگی )9( میشده است. پتانسیل گیاه به تشنج مطالعات کاهش ریسک عنان اخیر یک ثابت بیماریهای )11( میباشد. خاص داریی متعددی برای زعفران ذکر شده است. برخی متابلیتهای مشتق شده دلیل به زعفران کالله عملکرد هیپلیپیدمیک ضدسرفه آنتی اکسیدان آنتی دیابت... آثار مانی بسیاری خد دادهاند. نشان محافظتکننده نردژنراتی عصارههای قلب هستند. آبی مقابله خصصیات مربط به اجزای مختلف آن مانند کننده داریی الکلی Crocin Crocetin زعفران با اختالالت متعدد زعفران سایر مادی است که دارای خاصیت قی آنتی اکسیدان جمع آری رادیکالهای التهابی کالله )8( میباشند. اکسیژن آزاد سیتکاینهای پیش مطالعات نشان داده ند که بیش 151 ماده مختلف زعفران کارتنئیدها دارد. جد آلدهیدهای قیترین منترپن اجزای هستند. زعفران بر مطالعه ری ارتباط عملکرد ساختار ملکل نشان داده است که برخی یژگیهای زعفران به دلیل مشتقات دگلیکزیله آن میباشد )1( بقیه با مشتقات گلیکزیله مرتبط میباشد. اثرات ضدمیکربی زعفران نیز مطالعات متعددی مرد بررسی قرار گرفته آ یب )11( )1( است. Sengul همکارانش طی بررسیهای خد عنان میکنند که زعفران میتاند منبع غنی عامل آنتی اکسیدان آنتی میکربیال باشد. هدف این مطالعه بررسی اثر ضدمیکربی عصاره الکلی زعفران بر میکربهای بیماری زا حفره دهان قبیل استرپتککس متانس الکتباسیل کاندیداآلبیکانس بد. ماد رش ها تحقیقات میکربی حداقل 6 سیه هر میکرب کافی است. طرفی به دلیل هزینه بر بدن امکان اضافه کردن عصاره تعداد آبی نمنهها الکلی ندارد جد بر زعفران جهت لذا بررسی اثر ری میکربهای بیماریزای دهان تعداد 6 دانش آمز 9 ساله که هیچگنه بیماری سیستمیک نداشته یک دبستان به طر تصادفی انتخاب گردیدند. پسیدگی ناحیه نمنهها دندانهای پالک برداشته ملر میکربی شد بزاق جهت بررسی به آزمایشگاه برده شد. هر بیمار سه میکرب استرپتککس متانس کاندیداآلبیکنس الکتباسیل بررسی گردید که مجمع 18 میکرب بررسی شد. به جای کاربرد نمنهگیری استفاده شد. نمنههای رش استاندارد جهت نمنه گیری پالک

4 بررسي اثر ضد میكربي عصاره آبي الكلي کالله )فرزانه باراني کرباسكي همكاران( زعفران دندانی با به باکال سمت ری استریل سند کمک به لینگال دندانهای ناحیه خلفی پالک برداشته شد ری ساپ استریل قرار داده شد سپس داخل لله آزمایش حای ماده ترانسپرت قرار داده شد. جهت نمنه گیری بزاق ساپ آغشته به بزاق بیمار شد ری پلیت حای محیط کشت مایع ترانسپرت به آرامی کشیده شد به آزمایشگاه برده شد. سپس جهت نمنه گیری پسیدگی سند پسیدگیهای عمق شد زده کنار سطحی پسیدگی نمنه گیری انجام شد جهت جداسی باکتری آزمایشگاه برده شد. نمنهها محیط مایع ترانسپرت Modified Medium Stuart که دارای 5-11 گرم پپتن لیتر بده سیستم بافری داشت )باکتریها تکثیر نیافته بین نمیرند( شد نگهداری رسانده میشد. آزمایشگاه به ساعت یک ظرف حداکثر برای جداسی spp. Lactobacillus قسمتی نمنه محیط کشت ساعت مایع MRS Broth جه 37 سانتیگراد کشت گردید به مدت 48 هی بی شرایط نگهداری گردید. سپس باکتریهای رشد کرده محیط MRS Broth برداشته محیط MRS Agar کشت داده شد. کلنیهایی که یژگیهای مرد نظر را داشت به عنان الکتباسیلس نظر گرفته شد. جهت جداسی استرپتکک متانس نمنهها محیط استرپتکک سلکتی آگار کشت حرارت جه سانتیگراد میکرآیرفیل برای مدت به گرمخانه گذاری گردید. جداسی سابر دکسترز آگار کاندیدا محیط نمنهها کشت ساعت رنگی محیط کرم شرایط کشت آگار کشت داده شد حضر کاندیداآلبیکنز با آزمن بررسی میکرسکپی تلید ژرم تیب بررسی شد. تهیه سسپانسین جداسی پس میکربی میکربها همه آنها یک کشت الیه تهیه شد سایر انجام برای منبعی عنان به یخچال آزمایشات نگهداری شد. برای انجام هر آزمایش باید میکرب جدید ته داشت تا مطمئن باشیم میکربها زنده اند. رز قبل آزمایش همه نمنههای میکربی کشت ایزله ری محیط بالد آگار برای استرپتکک متانس الکتباسیل آگار Soyabean casein) trypton soya agar) )digest agar شرکت به متعلق (Himedia) کاندیدا برای کشت داده میشد انکباتر 37 جه سانتیگراد قرار داده شد. مرد الکتباسیل با تجه به اینکه میکربی بیهی رشد برای است نیمند محیط خاص باکتریهای بی هی است. برای کشت بی هی باید میکربها داخل جار بی هی( ظرفی غیر قابل نفذ که هیچ گنه تبادل گی با محیط خارج ندارد برای کشت )قرار میگیرد قرار استفاده مرد هی بی باکتریهای داده شند برای ایجاد این شرایط داخل جار یک عدد گ پک )MERCK( گذاشت که یک کیت شیمیایی جاذب اکسیژن است با مقدار 6 میلی لیتر نرمال سالین خیس شد انکباتر 37 سانتیگراد قرار داده شد. پس رشد میکربها این محیطهای یک رزه این میکربها سسپانسین تهیه شد. به این صرت که به کمک پیپت استریل مقدار کمی نرمال سالین استریل ری پلیت حای میکرب ریخته شد کمی با کلنیها مخلط سپس گردید میلیلیتر نرمال تا شد اضافه حاصل شد. یک به سالین غلظتی لله بد آزمایش معادل این که استریل سسپانسین مک نیم استاندارد 9 حای میکربی فارلند

5 302 مجله دانشكده دندانپزشكي مشهد / سال / 5931 ه / 04 شماره 9 این سسپانسین حای (Colony forming unit per 11 8 CFU/ml milliliter) یبراتر سسپانسین همگن شد. ری سپس بد. میکرب 1 سی سی این سسپانسین به سیله پیپت استریل به 9 سی سی نرمال سالین دیگر اضافه شد سسپانسن میکرب 11 7 CFU/ml به شد تهیه همین ترتیب سسپانسین 11 6 CFU/ml سسپانسین 11 7 CFU/ml تهیه شد. برای تهیه عصاره الکلی به ای هر 11 میلی گرم پ زعفران 111µ الکل 81 جه یک ارلن مایر ریخته شد. مدت 72 ساعت ارلن ری شیکر با سرعت 111 دقیقه قرار داده شد. پایان 72 ساعت ابتدا محتیات ارلن چند الیه پارچه تنظیف سپس کاغذ صافی عبر داده شد. عصاره حاصله پس تغلیظ با دستگاه جه 41 دمای حالل حذف سانتیگراد داخل چند پلیت ریخته شد سپس ری بن ماری 41 جه کامال خشک گردید. مقدار عصاره الکلی الزم برای رسیدن به غلظت مرد نظر ری تر انده گیری شد حجم مرد نظر محیط کشت داخل لله آزمایش حل شد. لله آزمایش حای محلل عصاره الکلی ری یبراتر یبره شد تا به یک محلل شفاف یکدست رسانده شد. پس تهیه محلل با غلظت الیه مرد نظر سایر غلظتها با نسبت 1/2 1/2 داخل یالهای استریل مجارت شعله تهیه شد. به این صرت که 1/2 غلظت الیه برداشته میشد به همین مقدار محیط کشت اضافه شد غلظتی نصف غلظت الیه به دست آمد به همین صرت تا غلظتهای پایینتر این کار ادامه پیدا کرد غلظت آخر 1/2 برداشته شد ریخته شد. برای تهیه عصاره آبی به ای هر 11 میلی گرم پ زعفران 111 میلی لیتر آب مقطر استفاده شد حل گردید. سپ) سپس برای 24 ساعت بر ری شیکر انکباتر قرار گرفت ماد چند الیه پارچه تنظیف رد شدند. سپس عصارهها بالن ته گرد ریخته شدند فریزر منفی 81 جه قرار گرفتند. فریز دستگاه عصارهها زدن یخ پس ای قرار داده شدند. ) خال حذف حالل صرت گرفت تهیه غلظت الیه مثل عصاره الکلی رقیق سی سریالی با نسبت 1/2 1/2 داخل یالهای استریل انجام شد غلظت انتهایی 1/2 ریخته شد. جهت مقایسه تأثیر عصاره میکربهای آزمایش مرد آبی الکلی زعفران بر ری بیتیک آنتی ضدباکتری استاندارد یعنی پنیسیلین )شرکت لقمان( یک ضد قارچ بر مؤثر کاندیداآلبیکنس نیستاتین) یعنی جابربن شرکت حنان تهران - ایران) استفاده شد. برای بررسی اثر آنتی بیتیک بر این سه میکرب غلظتهایی پنیسیلین نیستاتین به همان رش رقیق سی سریالی محیط کشتهای مناسب میکرب مرد نظر تهیه شد. پ این دارها ری تر انده گیری شد محیط کشت داخل لله آزمایش به کمک یبراتر حل شد با نسبت با نسبت 1/2 1/2 سایر غلظتها نیز تهیه شد. رش آزمایش به صرت رقیق سی متالی (Serial Dilution) ن پلیت 96 خانه بد. عصاره آ یب الکلی باید داخل محیط کشت مایع حل شده غلظتهای مختلف آنها تهیه شد که این محیط کشت برای میکربهای مختلف متانس کاندیدا متفات است.محیط کشت برای استرپتکک B.H.I.B (Brain Heart Infusion Broth) M.H.B (Muller Hinton Broth) (Brain Heart Infusion) B.H.I کشتها متعلق به شرکت مقدار آزمایش انجام جهت Himedia پلیت میباشد. همه هندستان بدند. 96 μl خانه الکتباسیل استفاده محیط شد. 211 هر غلظت ماده مرد آزمایش )عصاره

6 بررسي اثر ضد میكربي عصاره آبي الكلي کالله )فرزانه باراني کرباسكي همكاران( زعفران آبی یا الکلی( همین طر پنیسیلین 211 غلظتهای مختلف μl یا نیستاتین جهت مقایسه اثر آنها با تأثیر عصاره آبی الکلی داخل چاهکها ریخته شد. چاهکهای کنترل مثبت منفی نیز همین مقدار محیط کشت ریخته شد. سپس به همه چاهکها به جز چاهک کنترل منفی 21 مقدار سسپانسین μl هر شد. اضافه میکربی آزمایش برای هر میکرب سه بار تکرار شد. برای میکرب بی هی الکتباسیل پلیتها داخل جار بی هی حای گپک قرار داده شد. پس ریختن مقدار الزم هر غلظت پلیتها به مدت یک شب داخل انکباتر 37 جه سانتیگراد قرار داده شدند. این مدت رسیدن رطبت به میکربها جلگیری شد. برای چاهکها چاهکها بررسی میکرب تعیین نتایج شد. رشد به اینکه کرده دلیل مشخص است رنگی شد مقدار بدن کدام کت مرد ماد آزمایش تشخیص کت ناشی رشد میکرب با چشم مشکل بد لذا غلظتهای مشکک کشت ایزله تهیه شد. به این صرت که مجارت شعله یک لپ که ری شعله حرارت دید ارد چاهکهای مرد نظر شد ری محیط کشت آگار کشیده شد. آن گاه این محیط کشتها 24 ساعت داخل انکباتر قرار داده شدند رز بعد هر پلیتی که آن رشد میکرب نداشت یعنی کلنی هیچ باکتری آن دیده نمیشد غلظت MBC محاسبه میشد. تمامی شد. میزان ثبت نتایج بررسی مراحل تسط نیسنده انجام MIC (Minimal Inhibitory Concentration) عامل یک غلظت ضدمیکربی میکرارگانیسم جلگیری میکند به عنان میشد. که MIC تست MIC کمترین رشد شناخته ممکن است ری آگار یا یک مایع اسط انجام شد. رش معمل تعیین )11( سی متالی است. MIC تکنیک رقیق MBC (Minimal Bactericidal Concentration) کمترین غلظت عامل ضد میکربی که اکثر )99/9 صد( جمعیت میکربی تلقیح شده را بین میبرد این آزمایش غلظت الین چاهکی که کشت ایزله آن هیچ میکربی رشد گردید. به دادهها این نیافت غلظت MBC تعیین می شد. صرت تحقیق انحراف میانگین گزارش معیار برای مقایسه سه گره آزمن آنالیز اریانس یک طرفه برای مقایسه دبهدی گرهها آزمن تکی استفاده گردید. آزمن ها 1/15 نظر گرفته شد. يافتهها سطح معنی داری این مطالعه اثر ضدمیکربی عصاره آبی الکلی زعفران بر ری سه میکرب بیماریزای دهان )استرپتکک متانس الکتباسیلس کاندیداآلبیکنس( مرد بررسی قرار گرفت. میانگین دست آمده به MBC برای عصاره الکلی آبی زعفران پنیسیلین نیستاتین بر حسب 6 mg/ml نمنه استرپتکک متانس الکتباسیل هشت نمنه کاندیداآلبیکنس جدال 1 تا 3 آمده است. MBC آنالیز اریانس یک طرفه نشان داد ری استرپتکک متانس معنیداری دارند دبهدی گرهها )جدل یکدیگر بد )1/111>P(. میانگین )جدل )1 میانگین غلظت سه گره تفات آزمن تکی برای مقایسه حاکی تفات بین هر سه گره با آنالیز اریانس یک طرفه نشان داد سه گره MBC )2 ری الکتباسیل تفات نظر معنیداری دارند آزمن تکی برای مقایسه دبهدی گرهها حاکی تفات بین عصاره آبی با پنیسیلین همچنین

7 302 مجله دانشكده دندانپزشكي مشهد / سال / 5931 ه / 04 شماره 9 عضاره الکلی با پنیسیلین بد. )1/111>P( لی عصاره آبی با الکلی تفات معنیداری با هم نداشت )1/58=P(. آنالیز اریانس یک طرفه نشان داد میانگین MBC ری کاندیداآلبیکانس سه گره تفات معنیداری دارند )جدل 3(. آزمن تکی برای مقایسه دبهدی گرهها حاکی تفات بین عصاره آبی با نیستاتین )1/117=P( بد همچنین عضاره الکلی با نیستاتین عصاره آبی با الکلی نیز تفات معنیداری داشت )1/111>P(. جدل : 1 میانگین انحراف معیار غلظت mg/m( )MBC عصاره ی آبی الکلی زعفران پنیسیلین ری استرپتکک متانس حداکثر میانگین انحراف معیار حداقل /82 133/3 عصاره آبی 51 12/5 16/61 39/6 عصاره الکلی 1/15 1/15 1 1/15 پنیسیلین F=112/1 P<1/111 نتیجه آزمن جدل : 2 میانگین انحراف معیار غلظت mg/m( )MBC عصاره آبی الکلی زعفران پنیسیلین ری الکتباسیل حداکثر میانگین ± انحراف معیار حداقل /3±75/28 عصاره آبی ±121/33 عصاره الکلی 1/15 1/15 1/15±1 پنیسیلین F=94/2 P<1/111 نتیجه آزمن جدل : 3 میانگین انحراف معیار غلظت mg/m( )MBC عصاره آبی الکلی زعفران نیستاتین ری کاندیداآلبیکنس حداکثر حداقل میانگین ± انحراف معیار /5±21/65 عصاره آبی /5±51/75 عصاره الکلی 5 1/25 2/6±1/155 پنیسیلین F=259/3 P<1/111 نتیجه آزمن

8 بررسي اثر ضد میكربي عصاره آبي الكلي کالله )فرزانه باراني کرباسكي همكاران( زعفران بحث این زعفران مطالعه ری بر نشان داد سه که میکرب عصارههای بیماری آبی زای الکلی دهان استرپتکک متانس کاندیداآلبیکنس الکتباسیل دارای اثر ضدمیکربی بد بر ری هر سه میکرب اثر مهاری دارد. برای MBC استرپتکک کاندیداآلبیکنس محاسبه گردید. متانس الکتباسیل این غلظت عصاره الکلی آبی با پنیسیلین مقایسه شد اثر عصاره الکلی آبی ضعیفتر اثر پنیسیلین بد تفات آنها معنیدار بد. کاندیداآلبیکنس جزء فلر نرمال بدن است حفره دهان بیش نیمی افراد شرایطی مطالعه یافت خاص عالیم بیماری را ایجاد نشان دادکه تانایی بین بردن عصارههای آبی کاندیداآلبیکنس ضعیفتر نیستاتین بد تفات عصاره الکلی آبی بر ری داشت. میشد تنها )12( میکند. Bathaie )2( بیان کردند همکارش الکلی را دارند این زعفران اثر این معنیداری بین نتیجه کاندیداآلبیکنس جد آنالیزهای شیمیایی بیش 151 ماده مختلف را کالله زعفران نشان داده است قیترین اجزای زعفران کارتنئیدها آلدهیدهای منترپن هستند. اثر قی آنتیاکسیدانی مقابل اناع رادیکاله یا آزاد اکسیژن سیتکایینهای پیش التهابی خصصیات داریی متعدد زعفران بده که مربط به اجزای آن مانند مطالعه Crocin )11( Crocetin میباشد. Vahidi )13( همکارانش مختلف فعالیت ضدمیکربی قی تمام بخشهای گیاه به جز برگها مقابل باکتریها قارچها را نشان داد بیان کرد که فعالیت عصاره اتیل استات کالله زعفران خاصیت ضدقارچ بیشتر عصاره اتیل استات Zheng پرچمها خاصیت ضدباکتریایی بیشتری دارند. )14( همکارانش نیز مطالعه ای به بررسی اجزای فعال نظر زیستی گیاه زعفران پرداخته نشان دادند که عاله بر کالله زعفران اجزای دیگر آن مانند پشش گل پرچمها ساقه پیمانند گیاه دارای اثرات مفیدی میباشند. اثرات مطالعه این ضدقارچی سیتتکسیک آنتی اکسیدان پرچم کالله پشش گل ترکیبات زعفران شیمیایی تعیین اجزا این مجد شدند. پرچمها قی ترین اثر ضدقارچی سیتتکسیک را نشان دادند. هر د قسمت پرچم پشش گل دارای اثرات آنتی اکسیدان قابل تجه بدند. این یافتهها بیان میکنند که اثرات دارای کالله مانند زعفران گل پشش پرچم ضدقارچ سیتتکسیک آنتی اکسیدان هستند لی این اثر کالله بیشتر اجزای دیگر است. )15( Moghadam هلیکباکترپلری اثر ضدمیکربی زعفران را بر ری Pintado )16( همکارانش اثر باکتریسیدال زعفران را بر ری سالمنال آنتریکا به اثبات رساندند. تمامی این مطالعات مید این مطلب هستند که زعفران دارای اثرات ضدباکتریایی قارچی است که به دفعات ثابت شده اند. بنابراین با تجه به نتایج تحقیق حاضر شاید اثر دارای زعفران که بتان گفت ری بر ضدمیکربی میکربهای دهان نیز هست. پس زعفران میتاند بر ری قارچهای دهان نیز اثرگذار باشد. آنجائی که کلرهگزیدین که امرزه به عنان دهانشیه به کار میرد میتاند باعث تعادل خردن بهم رنگ دندانی تغییر میکربی شد همچنین استفاده آمکسی سیلین به عنان مرد انتخابی بیتیک آنتی میکربهای سبب دهانی مقامت میکربی میشد لذا استفاده ماده دیگری که

9 311 مجله دانشكده دندانپزشكي مشهد / سال / 5931 ه / 04 شماره 9 این عارض را نداشته باشد تصیه میشد که با تحقیقات بیشتری که انجام شده شاید بتانیم زعفران استفاده کنیم. نکته ای که این مطالعه باید به آن تجه نمد این است که مقدار مؤثر عصاره آبی الکلی بر ضد این میکربها شرایط آزمایشگاهی به دست آمده است ممکن است این غلظت شرایط کلینیکی چنین اثری نداشته باشند. علت این امر تفات محیط دهان محیط آزمایشگاه پالک است. تأثیر ماد دهان محیط ضدمیکربی بین ماتریکس مضعی سللی ری میکرارگانیسمهای پالک جلگیری میکند. نقش بزاق لحاظ تغییر ph دهان رقیق کردن ماده نیز قابل ذکر است. طرفی حرارت دهان با جه حرارت انکباتر متفات است جد خن محیط تان اکسیداسین احیای متفات نقاط مختلف حفره دهان نیز میتاند ری نتایج تأثیرگذار مسئله پلیتهای )17( باشد. للهها که است این دیگر تجه قابل حای محیط کشت ماده ضدمیکربی به طر مدام تماس با میکرب است لی استفاده ماد ضدمیکربی به صرت مضعی دهان دهانشیهها معمال پس چند ثانیه غرغره کردن ماده محیط دهان خنثی را آن اثر دهان مجد عامل شده حذف میکنند. مطالعه حاضر عصارههای زعفران به صرت خالص استفاده شدهاند به صرت فرمالسین یک دهانشیه - که حای ماد متعدد دیگری است - به کار گرفته نشده است. نتیجه گیری ننایج حاصل این مطالعه نشان داد که زعفران چه به صرت عصاره الکلی چه به صرت عصاره آبی میتاند بر ری میکربهای بررسی شده )استرپتکک متانس الکتباسیل کاندیداآلبیکنس( اثر مهارکنندگی کشندگی داشته باشد. لذا با تجه به گیاهی بدن منشا این دار بمی بدن نتیجه عارض کمتر آن مقرن به صرفهتر بدن این ماده مقایسه با کلرهگزیدین سایر ترکیبات آنتی باکتریال شاید بتان این گیاه به صرت دهانشیه استفاده نمد که نی به مطالعات بیشتری قالب مطالعات مداخلهای میباشد. تشکر قدانی این مقاله منتج پایان نامه دانشجیی به شماره 2625 میباشد که معانت پژهشی دانشگاه علم پزشکی مشهد به تصیب رسیده است. بدینسیله مراتب تشکر تقدیر خد را این معانت داشته همچنین سرکار خانم ثابتی کارشناس محترم آزمایشگاه میکربی دانشکده دارسی کمال تشکر را داریم. منابع 1. Kandil O, Radwan NM, Hassan AB, Amer AM, el-banna HA, Amer WM. Extracts and fractions of Thymus capitatus exhibit antimicrobial activities. J Ethnopharmacol 1994; 44(1): Bathaie SZ, Mousavi SZ. New applications and mechanisms of action of saffron and its important ingredients. Crit Rev Food Sci Nutr 2010; 50(8): Smith AJ, Jackson MS, Bagg J. The ecology of Staphylococcus species in the oral cavity. J Med Microbiol 2001; 50(11): Dal Bello F, Hertel C. Oral cavity as natural reservoir for intestinal lactobacilli. Syst Appl Microbiol 2006; 29(1): Scully C, el-kabir M, Samaranayake LP. Candida and oral candidosis: A review: An official publication of the American Association of Oral Biologists. Crit Rev Oral Biol Med 1994; 5(2):

10 بررسي اثر ضد میكربي عصاره آبي الكلي کالله )فرزانه باراني کرباسكي همكاران( زعفران Fløtra L. Different modes of chlorhexidine application and related local side effects. J Periodontal Res 1973; 8: Jones CG. Chlorhexidine: Is it still the gold standard? Periodontol ; 15: Hepso HU, Bjornland T, Skoglund LA. Side-effects and patient acceptance of 0.2% versus 0.1% chlorhexidine used as post-operative prophylactic mouthwash. Int J Oral Maxillofac Surg 1988; 17(1): Tang W, Eisenbrand G. Chinese drugs of plant origin chemistry, pharmacology, and use in traditional and modern medicine. 1 st ed. Springer Berlin Heidelberg; P Poma A, Fontecchio G, Carlucci G, Chichiricco G. Anti-inflammatory properties of drugs from saffron crocus. Antiinflamm Antiallergy Agents Med Chem 2012; 11(1): Sengul M, Yildiz H, Gungor N, Cetin B, Eser Z, Ercisli S. Total phenolic content, antioxidant and antimicrobial activities of some medicinal plants. Pak J Pharm Sci 2009; 22(1): Miller CH, Palenik CJ. Infection Control and Management of Hazardous Materials for the Dental Team. 2 nd ed. Elsevier Health Sciences P Vahidi H, Kamalinejad M, Sedaghati N. Antimicrobial Properties of Croccus sativus L. Iran J Pharm Res 2002: Zheng CJ, Li L, Ma WH, Han T, Qin LP. Chemical constituents and bioactivities of the liposoluble fraction from different medicinal parts of Crocus sativus. Pharm Biol 2011; 49(7): Moghaddam MN. In vitro antibacterial activity of saffron (Crocus sativus L.) extract and its two major constituents against Helicobacter pylori. Planta Med 2010; 76(12): P Pintado C, de Miguel A, Acevedo O, Nozal L, Novella JL, Rotger R. Bactericidal effect of saffron (Crocus sativus L.) on Salmonella enterica during storage. Food Control 2011; 22(3): Newman MG, Takei HH,Carrenza FA. Carranza's Clinical Periodontology. 10 th ed. Newman MG, Takei HH, Klokkevold PR, Carranza FA, editors. Philadelphia: W.B. Saunders Co; P. 42.